Operaens handling begynner med at Treemonisha, en ung kvinne oppvokst av bestemoren, blir utvist fra skolen sin for å ha undervist i avansert aritmetikk til klassekameratene. Hun vender tilbake til samfunnet sitt, hvor hun finner ut at folket lever i fattigdom og blir undertrykt av en korrupt leder ved navn Remus. Treemonisha bruker sin utdannelse og kunnskap for å hjelpe folket, og hun leder dem til slutt i et opprør mot Remus.
Operaens musikk er en blanding av afroamerikansk folkemusikk, klassisk musikk og ragtime. Joplin bruker ulike musikalske stiler for å skape en unik og stemningsfull lyd. Operaens temaer utforskes også gjennom musikken, der Joplin bruker spirituals og annen tradisjonell afroamerikansk musikk for å formidle karakterenes følelser og opplevelser.
Treemonisha ble ikke utført i løpet av Joplins levetid og var ikke allment kjent før på slutten av 1900-tallet. Den har siden blitt fremført og spilt inn av forskjellige operaselskaper og orkestre, og den regnes nå som et viktig verk i amerikansk musikkhistorie.