Aloysia Weber ble født i Zell im Wiesental, i Schwarzwald-regionen i Tyskland, 12. november 1760. Faren hennes, Fridolin Weber, var musiker og musikklærer, og moren hennes, Cäcilia Weber, var sanger. Aloysia viste tidlig talent innen musikk, og hun begynte å studere piano og stemme sammen med faren.
I 1777 flyttet Aloysia og familien hennes til München, hvor hun debuterte på scenen i en alder av 17. Hun ble raskt en suksessfull operasanger, og spilte i hovedroller i operaer av Mozart, Gluck og andre komponister.
I 1780 møtte Aloysia Wolfgang Amadeus Mozart, som da bodde i München. Mozart ble umiddelbart slått av Aloysia, og han komponerte flere arier for henne. De to var forlovet med å bli gift, men forlovelsen ble brutt i 1781.
Aloysia fortsatte å opptre med suksess som operasanger frem til 1790, da hun trakk seg fra scenen. Hun giftet seg med Joseph Lange, en hoffmusiker, i 1795. Paret fikk to barn, en sønn og en datter.
Etter pensjonisttilværelsen viet Aloysia Weber seg til å undervise i musikk. Hun underviste i piano og stemme til elever i alle aldre, og hun var en respektert musikklærer i Wien i mange år. Hun døde i Wien i 1839.