Disse overtonene er det som gir hvert musikkinstrument sin unike klangfarge eller tonefarge. For eksempel kan et piano og en gitar spille samme tone på samme tonehøyde, men de vil høres annerledes ut på grunn av de forskjellige overtonene som er tilstede.
Antallet og den relative styrken til overtonene i en lyd bestemmes av formen, størrelsen og materialet til det vibrerende objektet. For eksempel vil et strengeinstrument som en gitar eller fiolin ha et annet sett med overtoner enn et blåseinstrument som en fløyte eller klarinett.
Studiet av overtoner kalles harmonikk . Harmonikk spiller en viktig rolle i musikkteori, komposisjon og fremføring.