The Mane Six:
* Twilight Sparkle: En lilla enhjørning som studerer magi og lærer om vennskap.
* Applejack: En ærlig og hardtarbeidende oransje ponni fra Sweet Apple Acres.
* Sjeldenhet: En fasjonabel og sjenerøs hvit ponni som eier en butikk.
* Pinkie Pie: En munter og energisk rosa ponni som elsker fester.
* Fluttershy: En sjenert og blid gul ponni som elsker dyr.
* Rainbow Dash: En selvsikker og atletisk blå ponni som drømmer om å bli med Wonderbolts.
Andre bemerkelsesverdige karakterer:
* Spike: Twilight Sparkles lojale babydrageassistent.
* Prinsesse Celestia: Den snille og kloke herskeren av Equestria.
* Prinsesse Luna: Celestias søster som styrer natten.
* Discord: En rampete og kaotisk enhet som legemliggjør kaos.
* Starlight Glimmer: En tidligere skurk som lærer viktigheten av vennskap.
* Trixie: En skrytende og egoistisk ponni som hevder å være en mektig magisk bruker.
* Gilda: En gretten og opprørsk griffon som er Rainbow Dashs tidligere bestevenn.
* Derpy Hooves: En klønete og elskelig ponni som er en fanfavoritt.
* Zecora: En mystisk sebra som bor i Everfree-skogen og praktiserer urtemedisin.
Dette er bare et lite utvalg av de mange karakterene i My Little Pony:Friendship is Magic. Det er mange andre ponnier, skapninger og skurker som spiller viktige roller i showet!