Hunder:
* Dame: En vakker, renraset Cocker Spaniel som blir bortskjemt og elsket av sine eiere.
* Tramp: En gatevis, rufsete kjerring som i utgangspunktet er mistenksom overfor mennesker, men som gradvis varmer opp til Lady.
* Pålitelig: En klok og lojal blodhund som er Ladys beste venn.
* Jock: En cocky og energisk skotsk terrier som er Ladys andre venn.
* Buster: En gretten og territoriell Bull Terrier som er Jocks venn.
* Peg: En søt og frekk pekingeser som blir venn med Lady mens hun er alene.
* Bull: En tøff og krevende Bulldog som er Pegs kjæreste.
* Siamesiske katter: To rampete siameserkatter som er en konstant kilde til problemer for Lady.
Mennesker:
* Kjære Jim: Damens kjærlige eier.
* Kjære: Damens kjærlige eier.
* Tante Sarah: Jim Dear og Darlings tante som kommer på besøk og tar med seg den irriterende, bortskjemte lille terrieren, «babyen».
* Leveren: En vennlig mann som føder barnet.
Andre dyr:
* Boris: En gretten, gammel kattunge som bor sammen med Peg og Bull.
* Rotten: En stor rotte som Tramp kjemper mot i bakgaten.
* Hesten: Hesten som trekker vognen under spaghettiscenen.
Denne listen inkluderer hovedpersonene, men det er også flere mindre karakterer som vises gjennom hele filmen.