Lady Macbeth: Macbeths kone og medsammensvorne. Hun er en hensynsløs og ambisiøs kvinne som får Macbeth til å drepe kong Duncan. Etter drapet blir Lady Macbeth plaget av skyld og anger, og hun dør til slutt i en tilstand av galskap.
Kong Duncan: Kongen av Skottland i begynnelsen av stykket. Han er en snill og velvillig hersker, og drapet hans av Macbeth setter i gang historiens tragiske hendelser.
Bank: En medgeneral og nær venn av Macbeth. Han mistenker Macbeths involvering i drapet på kong Duncan, og han blir til slutt et offer for Macbeths paranoia.
De tre heksene: Tre overnaturlige skikkelser som profeterer at Macbeth vil bli konge. Profetiene deres setter i gang hendelsene i stykket, og de brukes som et symbol på skjebnen og konsekvensene av ambisjon.
Macduff: En skotsk adelsmann som motsetter seg Macbeths styre og til slutt leder styrkene som styrter ham.
Malcolm og Donalbain: Kong Duncans sønner. Malcolm flykter til England etter farens drap og returnerer til slutt til Skottland for å lede en hær mot Macbeth. Donalbain flykter også fra Skottland etter drapet, men spiller ingen nevneverdig rolle i resten av stykket.
Hecate: Gudinnen for hekseri og magi. Hun dukker opp i akt III av stykket og befaler heksene å gjøre sitt bud.