Arken regnes som den helligste relikvie av israelittene og ble oppbevart i Det Aller Helligste, Tabernaklets innerste helligdom. I følge 2. Mosebok ble arken konstruert av akasietre og kledd med rent gull innvendig og utvendig. Den hadde en krone av gull rundt dens øvre kant og fire gullringer på de fire hjørnene. To gullbelagte trestenger ble ført gjennom ringene på den ene siden og ble brukt til å bære arken. Arken hadde også et nådestole, eller deksel, laget av rent gull, som hadde to skulpturerte gylne kjeruber vendt mot hverandre med vingene i kontakt med hverandre. og overskygger nådestolen.
Arken spilte en avgjørende rolle i israelittenes reise gjennom villmarken. Det ble antatt å være Guds bolig på jorden og fulgte israelittene gjennom deres vandring. Hver gang de slo leir, ble arken plassert inne i tabernaklet, og når de gikk videre, bar prestene arken, dekket med et klede, foran prosesjonen.
Tilstedeværelsen av arken ga israelittene spesiell gunst og beskyttelse. Når arken ble båret inn i kamp, ville israelittene beseire fiendene sine. Men da arken ble tatt til fange av filisterne, ble de rammet av plager, og arken måtte returneres. Arken gikk senere tapt under plyndringen av Jerusalem av Nebukadnesar i 587 f.Kr. og har ikke blitt sett siden.
Oppholdsstedet til den tapte arken har vært gjenstand for spekulasjoner og fascinasjon i århundrer. Det har vært mange forsøk på å finne arken, men ingen har vært vellykket. Noen mener at arken ble ødelagt, mens andre spekulerer i at den kan være gjemt i huler eller underjordiske kammer i Jerusalem eller andre steder. Arkens forsvinning har også ført til en rekke legender, historier og til og med Hollywood-filmer.