Ironien oppstår ved at selve ambisjonen og hensynsløsheten som drev henne i begynnelsen til slutt blir hennes undergang. Skyldfølelsen for å myrde Duncan og anklage andre for forbrytelsen begynner å tære på samvittigheten hennes. Hun blir hjemsøkt av visjoner og begynner å oppleve søvngjengerepisoder. Hennes berømte søvngjengerscene i akt V, der hun prøver å vaske bort det imaginære blodet fra hendene, er et kraftig symbol på hennes indre plager og oppklaringen av hennes mentale tilstand.
Ironien forsterkes av kontrasten mellom hennes tidligere selvtillit og hennes endelige nedstigning til galskap. Hennes mentale sammenbrudd avslører skjørheten i styrken hennes, ettersom hun bare blir en skygge av sitt tidligere jeg. Denne transformasjonen fra en resolutt og ambisiøs kvinne til et skyldfølt og psykologisk ødelagt individ fungerer som en gripende påminnelse om konsekvensene av ukontrollerte ambisjoner og skyldfølelsens destruktive kraft.
Dessuten strekker ironien seg til det faktum at Lady Macbeth blir offer for sin egen planlegging. Hennes ønske om å være fri fra skyldfølelse får henne til å søke trøst i søvngjengeri, men det er i disse episodene hun avslører sin skyld og inkriminerer seg selv og mannen sin. Selve handlingene hun tar for å unnslippe sin mentale kval ender opp med å plage henne ytterligere og besegle skjebnen hennes.
Totalt sett ligger ironien i Lady Macbeths mentale tilstand i kontrasten mellom hennes første styrke og besluttsomhet, og hennes eventuelle transformasjon til et skyldfølt og knust individ. Hun blir en advarende historie om farene ved ambisjoner og de destruktive konsekvensene av å ignorere sin samvittighet.